10.3760/cma.j.issn.0253-3758.2015.07.009
乙醇及其代谢产物对新生大鼠原代培养心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白表达的影响
目的 明确乙醇及其代谢产物乙醛对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白表达的影响,并探讨该通道及乙醛在急性乙醇中毒引发心律失常的过程中所发挥的效应.方法 采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶提取并培养150只新生SD大鼠原代心房肌细胞,并采用免疫荧光法进行肌钙蛋白Ⅰ鉴定.采用细胞计数套件-8(CCK-8)法分别测定200 ～ 800 mmol/L乙醇及50～ 500 μmol/L乙醛处理24 h后细胞的生存率,以确定导致新生SD大鼠原代心房肌细胞凋亡所需的乙醛及乙醇浓度.建立以最大非凋亡浓度(200 mmol/L)的乙醇处理24h及相应剂量(100 μmol/L)乙醛处理24 h的新生SD大鼠原代心房肌细胞模型.采用Western blot法检测乙醇处理组、乙醛处理组及对照组心房肌细胞Kir3.1蛋白的表达情况,并对结果进行统计学分析.结果 (1)成功培养新生SD大鼠原代心房肌细胞,细胞免疫荧光鉴定所培养细胞为心肌细胞,且90％以上细胞肌钙蛋白Ⅰ染色阳性.(2) CCK-8法测定显示400 mmol/L以上的乙醇处理组的心肌细胞生存率明显低于对照组(P＜0.05),而200 mmol/L及以下的乙醇处理组心肌细胞生存率与对照组相比差异无统计学意义(P ＞0.05);400 μmol/L以上的乙醛处理组的心肌细胞生存率明显低予对照组(P＜0.05),而350 μmol/L及以下的乙醛处理组心肌细胞生存率与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).(3)Western blot检测显示200 mmol/L乙醇及100 μmol/L的乙醛处理24h的新生SD大鼠原代房心肌细胞Kir3.1蛋白表达分别高于对照组(44.52±23.07)％及(45.04±22.01)％ (P ＜0.01),而乙醇组与乙醛组之间Kir3.1蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 急性乙醇及乙醛处理均能够明显上调乙酰胆碱敏感型钾通道Kir3.1蛋白的表达.
乙醇、乙醛、肌细胞,心脏、G蛋白偶联内向整流钾通道、心律失常
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辽宁省科技厅计划项目2012225084;沈阳市科学技术计划项目F12-193-9-03
2015-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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