10.3760/cma.j.cn113903-20220125-00082
锌指蛋白580过表达对氧糖剥夺SH-SY5Y细胞凋亡的影响及可能机制
目的:探讨锌指蛋白580（zinc finger protein 580，ZNF580）在SH-SY5Y细胞系氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation，OGD）模型中的表达情况及其过表达对缺氧缺血神经元凋亡的影响及可能机制。方法:研究分两部分：（1）培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系，分为模型组和对照组，模型组建立OGD模型（95% N
2、5% CO
2、0.1% O
2的三气培养箱37 ℃恒温培养6 h），并于OGD后6、12和24 h提取蛋白，利用蛋白质印迹技术定量检测ZNF580的表达情况。（2）慢病毒转染过表达ZNF580对细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶3的活化形式（cleaved caspase-3）表达的影响：取对照组和模型组OGD后24 h的细胞。过表达组细胞首先通过慢病毒转染技术构建过表达ZNF580细胞，再行OGD处理。采用流式细胞技术检测各组细胞凋亡率，采用蛋白质印迹技术检测cleaved caspase-3的表达。采用两独立样本
t检验、单因素方差分析及LSD-
t两两比较进行统计学分析。
结果:（1）与对照组（1.00）相比，模型组OGD后6、12及24 h ZNF580相对表达量分别为1.36±0.05、2.12±0.07和1.69±0.05，均显著升高（LSD-
t值分别为9.20、28.26和19.21，
P值均<0.001）。（2）对照组、模型组、过表达组细胞凋亡率分别为（1.07±0.56）%、（21.51±1.65）%和（3.42±0.93）%，cleaved caspase-3相对表达量分别为1.00、2.47±0.59和1.70±0.25。与对照组相比，模型组的细胞凋亡率及cleaved caspase-3相对表达量升高（LSD-
t值分别为21.98和8.17，
P值均为0.001）；与模型组相比，过表达组的细胞凋亡率及cleaved caspase-3相对表达量降低（LSD-
t=19.45，
P=0.001；LSD-
t=4.28，
P=0.005）。
结论:缺氧缺血可导致ZNF580过表达，ZNF580过表达可能通过抑制cleaved caspase-3表达从而影响其酶解活化来减轻缺氧缺血神经元的凋亡。
转录因子、神经元、细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶３、缺氧缺血，脑、细胞系，肿瘤、慢病毒属、转染
25
山西省回国留学人员科研项目2017-113;山西省应用基础研究计划项目20210302124650;山西省卫生健康委科研计划项目2022027;Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars in Shanxi Province2017-113;Natural Science Foundation of Shanxi Province20210302124650;Scientific Research Project of Shanxi Provincial Health Commission2022027
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
838-843
