10.3877/cma.j.issn.2095-3216.2022.01.004
长链非编码核糖核酸LINC00261通过miR-148b-3p/PTEN途径对高糖环境中HK-2细胞的保护作用
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00261在糖尿病肾病中的表达,及其可能通过微小核糖核酸miR-148b-3p/PTEN途径对高糖环境中HK-2细胞的保护作用。方法:选择2016年3月至2018年5月本院的19例糖尿病肾病患者和23例健康对照者,采集血样,通过实时定量PCR(qRT-PCR)测定LINC00261和miR-148b-3p的表达。在细胞实验中,将HK-2肾小管上皮细胞分为7组:正常葡萄糖组(5.5 mmol/L培养,NG组)、高葡萄糖糖组(30.0 mmol/L培养,HG组)、其余5组也均为高葡萄糖培养:空质粒转染pcDNA(HG+pcDNA组)、转染LINC00261(HG+pcDNA-LINC00261组)、转染阴性对照anti-miR-NC(HG+anti-miR-NC组)、转染抑制剂anti-miR-148b-3p(HG+anti-miR-148b-3p组)、LncRNA和miRNA同时转染(HG+pcDNA-LINC0026+miR-148b-3p组)。应用Western印迹、细胞计数试剂盒8和流式细胞术分别检测PTEN蛋白表达、细胞增殖与凋亡。测超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测SOD活性和MDA含量。双荧光素酶报告实验用于LINC00261、miR-148b-3p、PTEN的相互关系鉴定。结果:与健康对照者比较,糖尿病肾病患者的LINC00261表达明显降低,而miR-148b-3p表达则明显增高(P<0.05)。过表达LINC00261或抑制miR-148b-3p后,高糖环境中HK-2细胞的miR-148b-3p表达、细胞凋亡及MDA含量均下降,而PTEN蛋白表达、细胞增殖及SOD活性均增高(P<0.05)。结论:LINC00261可能通过调控miR-148b-3p/PTEN途径,促进高糖环境中HK-2肾小管上皮细胞增殖、降低氧化应激、减少细胞凋亡。
糖尿病肾病、肾小管上皮细胞、LINC00261、miR-148b-3p、PTEN、氧化应激
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2022-07-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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