10.3877/cma.j.issn.2095-3216.2018.01.008
高糖与高尿酸通过醛糖还原酶通路协同作用加重内皮细胞损伤
目的 寻找高血糖与高尿酸血症协同加重内皮细胞损伤的共同作用靶点和分子机制,为糖尿病合并高尿酸血症患者心血管疾病的保护提供干预靶点.方法 用人脐静脉内皮细胞系(HUVEC-C)给予高糖(30 mmol/L,HG)、高尿酸(600 μmol/L,UA)和高糖(HG)+高尿酸(UA)联合培养48 h.利用10 μmol/L阿司他丁阻断醛糖还原酶(AR)的活性.实时定量PCR检测内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)和AR mRNA的表达;Western blot检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2 (NOX2)、NOX4、eNOS和AR蛋白的表达;共聚焦显微镜检测细胞内ROS的活性;一氧化氮(NO)试剂盒检测NO活性.结果 与单独HG组和UA组相比,HG+ UA共培养组明显降低eNOS mRNA水平和蛋白表达,减少NO产生,增加内皮细胞胞内ROS活性;HG +UA共培养明显上调AR mRNA水平和蛋白表达.应用AR抑制剂能够明显增加HG+UA组内皮细胞eNOS mRNA水平和蛋白表达,增加内皮细胞NO的分泌水平.AR抑制剂能够明显下调HG+ UA组内皮细胞NOX4的蛋白表达,对NOX2无影响;降低细胞内ROS的含量.结论 高血糖和高尿酸协同作用通过激活醛糖还原酶途径下调内皮细胞eNOS的表达,增加ROS活性,减少NO的产生,加重内皮细胞功能障碍;而抑制醛糖还原酶,能够通过抑制NOX4表达,阻断这种协同损伤作用.
高糖、高尿酸、内皮细胞、醛糖还原酶、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4
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国家自然科学基金81470949
2018-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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