10.3877/cma.j.issn.1674-3946.2012.03.051
GDDR位点突变载体的构建和稳转细胞系的建立
目的 构建GDDR位点突变载体,使GDDR翻译蛋白无法通过二硫键与TFF1结合,建立稳定转染GDDR位点突变载体的人胃癌SGC-7901稳转细胞系.方法 设计GDDR Cys38位点突变引物,构建GDDR位点突变的真核表达载体;脂质体法转染重组质粒至人胃癌细胞系SGC-7901;G418筛选阳性细胞并扩大培养;实时定量 PCR检测突变GDDR mRNA在人胃癌细胞系SGC-7901的表达.结果 经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列; 实时定量 PCR证实突变GDDR在人胃癌SGC-7901稳转细胞系高表达.结论 GDDR定点突变载体构建成功,建立了稳定转染GDDR位点突变载体的SGC-7901细胞系,为进一步研究GDDR的结构和功能提供了条件.
遗传载体、细胞系、肿瘤、点突变、转染
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R73;R77
国家自然科学基金资助项目81071690
2013-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
274-280
