10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2019.06.006
内毒素耐受树突状细胞免疫功能变化及其对脓毒症模型小鼠的作用
目的 探讨内毒素耐受树突状细胞(endotoxin tolerant dendritic cell , ETDC)免疫功能的改变,观察其对脓毒症模型小鼠的作用.方法 以脂多糖刺激小鼠来源骨髓树突状细胞制备ETDC,流式细胞仪检测ETDC表面标志物主要组织相容性复合体( major histocompatibility complex , MHC)Ⅱ、CD86和CD11c表达水平,细胞计数试剂盒检测T淋巴细胞增殖率, ELISA检测细胞上清液中细胞因子水平.将36只BALB/c小鼠分为4组,空白对照组不做任何处理,假手术组行单纯切开缝合术,脓毒症组和ETDC回输治疗组行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型前,分别尾静脉回输0.9%氯化钠溶液和ETDC与0.9%氯化钠混悬液.检测各组小鼠血丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase , ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspatate, AST)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factro, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-10水平和脾脏辅助性T-淋巴细胞( help T cells, Th)17/调节性T淋巴细胞(regulatory T cells, Treg)比例,观察小鼠肝脏、肾脏和回肠病理学表现.组间比较采用t检验或χ2检验.结果 ETDC表面MHCⅡ、CD86和CD11c表达分别为70.4%、43.1%、73.1%,较成熟树突状细胞(mature dendritic cell, mDC)的96.1%、89.5%和84.6%显著下降(χ2 值分别为56.47、83.78和23.29,均P＜0.01). ETDC细胞上清液中IL-10、TNF-α和IL-6分别为(978.04 ±56.70)、(980.34 ±111.96)和(12 743.03 ±865.81) ng/L, mDC分别为(741.35 ±99.23)、(1 703.11 ±117.00)和(19 052.28 ±1 145.84) ng/L,差异均有统计学意义(t值分别为5.073、10.93和10.76,均P＜0.01). ETDC和T淋巴细胞1∶5、1∶10共培养的增殖率分别为(676.95 ±85.99)%和( 514.00 ±106.39 )%, mDC 为(956.25 ±127.12)%和( 772.07 ± 214.08)%.ETDC回输治疗组小鼠肝脏、肾脏和回肠病理学改变明显轻于脓毒症组. ETDC回输治疗组小鼠血清ALT 和 AST 为(299.71 ±36.91)和(690.39 ±154.92) U/L, TNF-α、IL-6 和IL-10 分别为(0.067 ±0.005)、(0.428 ±0.051)和(0.058 ±0.005) ng/L,脓毒症组ALT和AST为(620.67 ±69.27)和(1 430.17 ±134.05)U/L, TNF-α、IL-6和IL-10分别为(0.085 ±0.007)、(0.774 ±0.088)和(0.036 ± 0.005)ng/L,差异均有统计学意义( t值分别为11.60、10.96、5.991、8.657 和8.042,均P＜0.01).ETDC回输治疗组小鼠Treg/Th17比例为23.4%,脓毒症组为60.8%( χ2 ＝28.69, P＜0.01).结论ETDC回输对脓毒症模型小鼠具有保护作用,可能是通过调节T淋巴细胞分化发挥了负向免疫调控作用.
脓毒症、树突状细胞、内毒素耐受
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温州市科技计划项目2017Y0999 Fund program:The Science and Technology Planned Projects of Wenzhou City 2017Y0999
2019-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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