10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2019.03.004
金诺芬与伏立诺他联合对革兰阴性菌抗菌活性的影响及金诺芬作用位点的研究
目的 明确金诺芬对革兰阴性菌抗菌活性的作用靶点,探究金诺芬与伏立诺他联合对革兰阴性菌抗菌活性的影响.方法 采用缺失硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)菌株明确靶点基因,通过药物敏感试验,棋盘微量稀释法,以及时间-杀菌动力学试验来观察金诺芬与伏立诺他的联合对大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和多耐药鲍曼不动杆菌是否具有协同作用.分别观察大肠埃希菌BW25113 (wild type,WT)菌株敲除表达Trx的相关基因(trxA、trxB、trxC),表达谷胱甘肽(glutathione,GSH)的基因(gor),对金诺芬药物的敏感结果,以及金诺芬对△trxC、△gor的时间-杀菌动力学影响,并使用回补菌株(C-trxA、C-trxB、C-trxC、C-gor)来验证,明确基因目标.结果 药物敏感试验结果显示,金诺芬对大肠埃希菌BW25113和肺炎克雷伯菌ATCC 43816菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)均为64 mg/L,对铜绿假单胞菌PA14的MIC为128 mg/L,对鲍曼不动杆菌ATCC 17978和AB5075的MIC为32 mg/L;伏立诺他对所有菌株的MIC均为512 mg/L.金诺芬联合伏立诺他对大肠埃希菌BW25113、鲍曼不动杆菌ATCC 17978、多耐药鲍曼不动杆菌AB5075、肺炎克雷伯杆菌ATCC 43816、铜绿假单胞菌PA14的分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentrationindex,FICI)分别约为0.313、0.375、0.375、0.375和0.375,所有值均＜0.5,表现为协同作用.在缺乏不同基因的敲除菌株药物敏感结果中显示,金诺芬对△trxC的MIC由64 mg/L上升至256 mg/L,对△gor的MIC下降至16 mg/L,对△trxA、△trxB的MIC未发生改变.金诺芬对回补菌株(C-trxC,C-gor)与对大肠埃希菌BW25113表现出相同的抗菌活性,细菌数量减少约1.8 lg菌落形成单位(colong formins units,CFU)/mL;而金诺芬对△trxC的抗菌活性明显降低,细菌数量减少＜1 lg CFU/mL;在△gor中,细菌数量减少4.6 lg CFU/mL,抗菌活性明显增加.结论 金诺芬对抗革兰阴性菌的潜在靶点基因可能是trxC,为临床上治疗多耐药的革兰阴性菌提供新的思路和途径.
金诺芬、革兰阴性菌、硫氧还蛋白还原酶、伏立诺他、协同作用
37
国家自然科学基金81673242National Natural Science Foundation of China 81673242
2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
149-154
