DOI：10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2019.02.007

骨髓间充质干细胞源性外泌体对酒精性肝损伤的保护作用

引用

摘要：

目的探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体(mesenchymal stem cells derived exosomes,MSC-exosomes)对酒精性肝损伤的保护作用.方法将18只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠分成对照组、模型组和外泌体组,每组6只.模型组和外泌体组小鼠Lieber-DeCarli词料饲养4周并在第26、27和28天分别进行乙醇灌胃构建酒精性肝损伤模型,而对照组小鼠给予等热量的葡聚糖麦芽糖.外泌体组小鼠分别在实验第14和26天尾静脉注射MSC-exosomes进行治疗.实验后,检测各组小鼠ALT和AST水平,观察肝组织病理改变,蛋白质印迹法检测核因子相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf-2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、CD63、CD81、TSG101和细胞色素C蛋白质表达情况,实时定量PCR分别检测Nrf-2、HO-1、IL-10和IL-17的mRNA变化,试剂盒分别检测血清IL-10、IL-17水平和肝组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)氧化应激指标,流式细胞仪分析肝脏Treg和Th17数量.各组之间比较采用单因素方差分析.结果 MSC-exosomes表达阳性标志物CD63、CD81和TSG101,但不表达阴性标志物细胞色素C.模型组小鼠血清ALT和AST分别为(87.3±25.1)U/L和(223.2±43.5)U/L,外泌体组小鼠血清ALT和AST分别为(47.7±12.0)U/L和(128.2±33.6)U/L,两组比较差异均有统计学意义(F值分别为12.818和12.226,均P<0.05).与对照组相比,模型组小鼠肝脏SOD活性和GSH水平明显降低,MDA水平明显升高;而外泌体组的SOD活性和GSH水平明显高于模型组,MDA水平明显低于模型组,比较差异均有统计学意义(F值分别为4.245、24.074和36.675,均P<0.05).与对照组相比,模型组小鼠肝内Nrf-2和HO-1蛋白表达显著降低,而经MSC-exosomes治疗后表达明显升高,比较差异均有统计学意义(F值分别为33.623和14.960,均P<0.05);各组间Nrf-2及HO-1 mRNA表达趋势与蛋白质表达趋势相同(F值分别为20.784和276.336,均P<0.05).正常组Treg/Th17比值为4.3±0.9、模型组为0.4±0.2、外泌体组为3.4±0.5,各组间比较差异有统计学意义(F=64.227,P<0.05).与对照组相比,模型组小鼠血清IL-17蛋白水平和肝内IL-17基因表达明显升高,而MSC-exosomes治疗后血清IL-17蛋白水平和肝内IL-17基因表达显著降低,比较差异均有统计学意义(F值分别为15.581和40.095,均P<0.05).模型组小鼠血清IL-10蛋白水平和肝内IL-10基因表达明显降低,而MSC-exosomes治疗后血清IL-10蛋白水平和肝内IL-10基因表达显著升高,比较差异均有统计学意义(F值分别为98.268和153.743,均P<0.05).结论 MSC-exosomes可能通过激活Nrf-2/HO-1抗氧化通路及调节肝脏Treg/Th17比例,从而改善酒精诱导的肝脏损伤.

关键词：肝疾病、酒精性、炎症、免疫、骨髄间充质干细胞、外泌体、氧化应激

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在线出版日期：2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：97-103

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