10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2018.03.004
α 干扰素-1b调控蛋白激酶Cε、Cα 抑制肝星状细胞纤维化及机制的体外研究
目的 探讨α干扰素-1b调控蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)蛋白激酶Cε、蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)抑制肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)纤维化及机制.方法 采用不同浓度α干扰素-1b(100、200、400、800、1000 U/mL)处理HSC-T6细胞株,同步设置无α干扰素-1b处理的对照组;四甲基偶氮唑盐比色法分析HSC-T6细胞增殖;分析羟脯氨酸含量变化;免疫荧光染色检测PKCε和PKCα的表达,RT-PCR检测PKCε、PKCα、β-链蛋白(β-catenin)、生存素(Survivin)mRNA的水平.蛋白质印迹法检测PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin蛋白水平.采用One-Way ANOVA分析.结果 给药24 h后,100、200、400、800、1000 U/mLα干扰素-1b组抑制率分别为(15.85±1.05)％ 、(36.59±1.03)％ 、(45.12±1.05)％ 、(50.00±1.01)％ 和(62.20±1.02)％,组间比较差异有统计学意义(F=27.478,P<0.01);48 h抑制率分别为(20.87±1.09)％ 、(43.96±1.08)％ 、(53.85±1.08)％ 、(64.84±1.06)％ 和(74.72±1.07)％,组间比较差异有统计学意义(F=25.321,P<0.01).48 h时半抑制浓度为343.47 U/mL.100、200、400 U/mLα干扰素-1b组的羟脯氨酸水平分别为(7.48±0.28)、(6.26±0.17)、(3.86±0.20)μg/mL,均低于对照组的(8.47±0.32)μg/mL,差异均有统计学意义(t值分别为4.033、10.564和21.160,均P<0.05).100、200、400 U/mLα干扰素-1b组的PKCε荧光强度均低于对照组,比较差异均有统计学意义(t值分别为1.984、2.457、7.771,均P<0.05);PKCα的荧光强度分别也均低于对照组,比较差异均有统计学意义(t值分别为9.232、15.921、22.222,均P<0.01).随着α干扰素-1b水平的增加,HSC-T6细胞PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin mRNA水平较对照组明显下降,比较差异均有统计学意义(t值分别为7.020、24.562、45.701和14.241,均P<0.01).随着α干扰素-1b水平的增加,HSC-T6细胞PKCε、PKCα、β-catenin和Survivin蛋白水平较对照组明显降低,比较差异均有统计学意义(t值分别为9.564、4.409、10.036和6.794,均P<0.01).结论 α干扰素-1b能够剂量依赖性地下调肝星状细胞胶原表达,降低PKCε、PKCα、β-catenin、Survivin表达水平,抑制HSC-T6增殖.
IFNα-1b、肝星状细胞、增殖、分子机制
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12016年浙江省医药卫生一般研究项目2016KYA162;2016年宁波市科技重大专项肝病基金2016C51008 2016 General Medical and Health Research Project of Zhejiang2016KYA162;2016 Liver Fund of Ningbo Municipal Science and Technology Major Project2016C51008
2018-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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