10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2016.05.005
微小核糖核酸-548ah 靶向组蛋白去乙酰化酶4对乙型肝炎病毒复制和表达的影响
目的：探讨miRNA‐548ah靶向组蛋白去乙酰化酶（HDAC ）4对 HBV复制和表达的影响。方法 miRNA‐548ah模拟剂和抑制剂转染 HepG2，2，15细胞，荧光定量 PCR 检测转染前、后miRNA‐548ah和 HDAC4 mRNA的表达，蛋白质印迹检测 HepG2，2，15细胞中 HDAC4蛋白的表达。生物信息学方法分析miRNA‐548ah靶基因，构建含候选靶基因 HDAC4的3′UTR双荧光素酶表达载体，检测荧光素酶活性。ELISA测定细胞培养上清液中 HBsAg、HBeAg水平，荧光定量 PCR检测细胞培养上清液中 HBV DNA水平。两组间比较采用两样本均数 t检验，多组间比较采用方差分析并SNK‐q检验。结果在 HepG2，2，15和 HepG2细胞中，miRNA‐548ah分别为5．74±0．02和2．96±0．40（t＝11．89，P＜0．01），HDAC4分别为9．38±0．39和18．13±0．34（ t＝29．39， P＜0．01）。转染miRNA‐548ah抑制剂可抑制HepG2，2，15细胞中miRNA‐548ah的表达（1．01±0．13，t＝15．48，P＜0．01）。与对照组比较，抑制剂组 HepG2，2，15细胞培养上清液中 HBsAg[（6．45±0．46） IU／mL比（2．60±0．20） IU／mL ，t＝7．48，P＜0．01]、HBeAg[（5．49±0．27） NCU／mL比（4．15±0．34） NCU／mL ，t＝3．10，P＜0．05]、HBV DNA[（3．93±0．06） lg拷贝／mL比（2．04±0．07） lg拷贝／mL ，t＝18．89，P＜0．01]水平均明显降低。转染miRNA‐548ah模拟剂，HDAC4的表达水平明显降低（2．98±0．94）；转染抑制剂则表达水平明显升高（23．77±6．74），差异有统计学意义（F＝9．34， P＜0．01）。miRNA‐548ah模拟剂对HepG2，2，15细胞中HDAC4蛋白表达有显著抑制作用（0．53±0．14比0．23±0．02，t＝3．58， P＝0．02），对psiCHECK‐HDAC4载体荧光素酶活性表达也有显著抑制作用（7．62±0．45比6．65±0．27，t＝3．18， P＝0．03）。结论 miRNA‐548ah可通过调控靶基因HDAC4，促进HBV的复制和表达。
微小RN A-548ah、肝炎病毒、乙型、组蛋白去乙酰化酶-4
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R39;R97
国家自然科学基金81571997；江苏省卫生厅面上项目H201362；泰州市社会发展项目T S201531Fund programNational Natural Science Foundation of China 81571997；General Program of Jiangsu Province Health Department H201362；Social development project of Taizhou City TS201531
2016-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
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