10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2016.02.0010
肿瘤坏死因子-α对急性肝功能衰竭大鼠肠黏膜Claudin-1、Zonula Occludens-1和肌球蛋白轻链激酶表达的影响及肿瘤坏死因子α拮抗剂的干预效果
目的 研究TNF-α对急性肝功能衰竭(ALF)大鼠肠黏膜Claudin-1、Zonula Occludens(ZO)-1蛋白和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响及TNF-α拮抗剂干预效果.方法 健康雄性SD大鼠270只,重复造模5次,每次54只,按照随机数字表法将54只大鼠分为正常对照组、模型组和干预组.正常对照组6只仅腹腔注射0.9％氯化钠溶液12 mL/kg;模型组和干预组各24只,均腹腔注射DGalN 1 200 mg/kg,建立ALF模型;干预组在给予D GalN 24 h前腹腔注射TNF-α拮抗剂(rhTNFR:Fc)12.5 mg/kg.模型组与干预组于造模后8、24、48、72 h各时间点处死6只大鼠,正常对照组于72 h同时处死动物.应用生物化学方法检测肝功能;ELISA法检测血清TNF-α水平;肝组织和末段回肠组织经HE染色检测;免疫组织化学和Western印迹法检测各组末段回肠Claudin-1、ZO-1蛋白和MLCK的表达.组内两两比较采用t检验.结果 用D-GalN成功诱导ALF模型.模型组72 h转氨酶开始下降时,TBil继续上升,出现胆酶分离现象,而干预组未出现该现象.模型组72h末段回肠可见绒毛倒伏,部分绒毛尖端脱落,黏膜层可见大量中性粒细胞浸润;干预组末段回肠结构完整,黏膜层可见少量中性粒细胞浸润.模型组、干预组血清TNF α水平均在24 h升至高峰,分别为(239.83±15.81)、(182.71±17.08) ng/L;均较正常对照组”(24.19±3.57) ng/L”显著升高,差异均有统计学意义(t值分别为22.68、15.73,均P＜0.01);而干预组显著低于模型组,差异有统计学意义(t=4.58,P＜0.01).模型组大鼠回肠黏膜Claudin-1、ZO-1相对表达量在早期均逐渐降低,24 h下降至最低,分别为0.355±0.068、0.387±0.091,均显著低于正常对照组(1.640±0.188、1.015±0.150),差异有统计学意义(t值分别为12.87、7.14,均P＜0.01);干预组大鼠回肠黏膜Claudin-1、ZO-1蛋白相对表达量亦于24 h下降至最低,分别为1.051±0.370、0.642±0.082,明显低于正常对照组(t值分别为2.84、4.36,均P＜0.05),但均高于模型组,差异有统计学意义(t值分别为3.70、4.15,均P＜0.01).模型组、干预组大鼠回肠MLCK相对表达量在早期均逐渐升高,24 h均上升至高峰,分别为1.298±0.194、1.033±0.073,明显高于对照组的0.460±0.069,差异有统计学意义(t值分别为8.16、11.44,均P＜0.01),但干预组低于模型组,两者差异有统计学意义(t=2.56,P＜0.05).结论 ALF大鼠模型的血清TNF-α水平升高,Claudin-1和ZO-1蛋白表达下降、MLCK含量增加,使得细胞收缩加剧及细胞间隙增大.而TNF-α拮抗剂通过抑制MLCK含量的增加、阻止Claudin-1和ZO-1蛋白表达的下降,使肝功能明显改善、降低细胞炎性反应和肝细胞凋亡.
肿瘤坏死因子α、肝功能衰竭,急性、Claudin-1、ZO-1、肌球蛋白轻链激酶、肿瘤坏死因子-α拮抗剂
34
2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
103-110
