10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2015.06.010
内毒素耐受小鼠脾脏 CD11clowCD45RBhigh树突状细胞对急性肝功能衰竭锌指蛋白 A20表达的影响
目的：观察内毒素耐受 CD11clow CD45RBhigh DC 对急性肝功能衰竭小鼠锌指蛋白 A20表达的影响，探讨其在急性肝功能衰竭治疗中的作用及可能机制。方法建立内毒素耐受小鼠模型，经免疫磁珠法分选正常小鼠脾脏来源 CD11clow CD45RBhigh DC 和内毒素耐受小鼠脾脏来源 CD11clow CD45RBhigh DC。选取健康雄性 BALB／c 小鼠126只，随机分为正常对照组（A 组6只）、急性肝功能衰竭组（B 组40只）、正常小鼠脾脏 CD11clow CD45RBhigh DC 治疗组（C 组40只）和内毒素耐受小鼠脾脏CD11clow CD45RBhigh DC 治疗组（D 组40只）；B、C、D 三组小鼠同时腹腔注射 D-GalN 600 mg／kg和脂多糖10μg／只，A 组注射等体积0．9％氯化钠溶液；30 min 后 C 组腹腔注射正常小鼠脾脏来源 CD11clow CD45RBhigh DC（1×106／只，0．2 mL／只），D 组腹腔注射内毒素耐受小鼠脾脏来源 CD11clow CD45RBhigh DC（1×106／只，0．2 mL／只）进行干预，A、B 组则给予相同剂量的0．9％氯化钠溶液。检测各组小鼠各时间点血 ALT、AST 水平；采用 HE 染色观察各组小鼠各时间点肝组织病理变化；反转录（RT）-PCR 和Western 免疫印迹法检测各组小鼠各时间点 TNF-α、核因子-κB、锌指蛋白 A20表达情况。样本均数比较采用单因素方差分析。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐者采用 LSD 检验。结果 B 组在造模2 h 后 ALT、AST 开始逐渐升高，于24 h 达高峰，明显高于 A 组（t 值分别为31．00和11．52，均 P ＜0．05）。C、D 两组于造模2 h 后 ALT、AST 也逐渐升高，于24 h 达高峰，与 B 组比较，差异均有统计学意义（t 值分别为14．60和26．43，均 P ＜0．05）。B 组小鼠 TNF-αmRNA（t ＝427．58）、核因子-κB mRNA （t＝122．42）及蛋白表达量（t 值分别为179．35和165．98）随着时间的推移逐渐升高，至12 h 达高峰，与A 组相比差异有统计学意义（均 P ＜0．05）。B 组小鼠锌指蛋白 A20 mRNA 及蛋白则随着时间的延长逐渐降低，在12 h 达到最低，与 A 组相比差异有统计学意义（t 值分别为90．80和160．43，均 P ＜0．05）；A20 mRNA 及蛋白表达量则随着时间的延长逐渐增加，在12 h 达到最高值，且 D 组增加较 C 组更明显，差异有统计学意义（t 值分别为11．21和24．80，均 P ＜0．05）。结论内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11clow CD45RBhigh DC 治疗可减轻肝脏损害。
肝功能衰竭、急性、脂多糖类、树突细胞、NF-κB、锌指蛋白 A20
R3 ;R6
浙江省自然科学基金资助项目LY12H03002
2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
351-357
