10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2013.03.003
甲基莲心碱对转化生长因子-β1诱导的肝星状细胞增殖及gremlin表达的影响
目的 观察甲基莲心碱对转化生长因子(TGF)-β1诱导的肝星状细胞(HSC)增殖及gremlin、TGF-β1、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 体外培养HSC-T6细胞,分成正常对照组、TGF-β1干预组、TGF-β1+甲基莲心碱分别为2.0、4.0、8.0 mmol/L联合干预组,细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR、Western印迹法分别检测HSC-T6细胞gremlin、TGF β1、α-SMA mRNA及蛋白表达.组间差异采用单因素方差分析,方差齐性者两两比较采用LSD法,方差不齐者采用Dunnett T3检验,相关性采用Pearson直线相关分析.结果 与正常对照组相比,TGF-β1对HSC-T6细胞增殖无影响(P>0.05),但能上调gremlin、TGF-β1、α-SMAmRNA及蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05).与TGF-β1干预组相比,甲基莲心碱能抑制HSC-T6细胞增殖,呈时间、剂量依赖性,以TGF-β1+甲基莲心碱8 mmol/L联合作用72 h对HSC-T6细胞抑制最显著(F=2817.056,P<0.01),抑制率为(69.08±1.05)%.甲基莲心碱可不同程度抑制gremlin mRNA及蛋白的表达,TGF-β1+8 mmol/L甲基莲心碱联合干预组表达量最低,为0.2483±0.0084、0.9307±0.0224.与TGF-β1干预组比较,gremlin、TGF-β1、α-SMA mRNA表达量随甲基莲心碱浓度的增加呈递减趋势(F=16.800、209.246、70.486,均P<0.05),蛋白表达量也呈递减趋势(F=56.588、12.550、32.141,均P<0.05).gremlin、TGF-β1、α-SMA的表达呈两两正相关(P<0.05).结论 甲基莲心碱能有效作用于HSC,gremlin可能参与肝纤维化的发生发展,有望成为肝纤维化治疗新靶点.
生物碱类、骨形态发生蛋白质类、转化生长因子β1、肝硬化、星形细胞
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2013-08-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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