10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2012.10.001
转乙型肝炎病毒表面抗原基因小鼠肝细胞质膜蛋白质组学研究
目的 分析转HBsAg基因小鼠与正常小鼠肝细咆质膜的差异蛋白质组,为了解乙型肝炎发病机制,寻找药物作用靶标提供指导.方法 构建6月龄转HBsAg基因C57小鼠模型,检测转基因组小鼠和正常对照C57小鼠肝脏病理变化.以转基因组和正常对照C57小鼠肝脏为材料,蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法纯化肝细胞质膜,Western印迹验证纯化的质膜组分纯度,二维凝胶电泳结合ImageMaster软件图像分析质膜蛋白质,获得的差异蛋白质点经胰酶酶切后,进行差异蛋白质的液相色谱串联质谱分析鉴定.结果 转HBsAg基因小鼠肝脏呈现肝炎表现,而正常对照C57小鼠肝脏未见异常.蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法可以有效富集小鼠肝质膜组分,并减少线粒体的污染.小鼠肝脏质膜组分中,共获得30个≥2倍的差异蛋白质点,成功鉴定到11个可能与HBV感染相关的差异蛋白质,其中9个蛋白质在转基因鼠肝质膜中表达上调,2个蛋白质表达下调.这些差异蛋白质包括细胞支架蛋白、心脏钙离子释放通道蛋白、细胞色素B5和ATP合成酶α亚基等.结论 本研究鉴定了一批与HBsAg基因表达相关的小鼠肝脏质膜蛋白质,它们可能是乙型肝炎的药物作用靶标,本研究将为进一步探讨HBV感染的机制提供指导.
小鼠、转基因、肝炎表面抗原、乙型、病毒包膜蛋白质类、蛋白质组学
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R512.62(传染病)
王宝恩肝纤维化基金资助项目20100031;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目10FX114
2012-12-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
577-582