10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2010.02.001
应用蛋白质组学技术筛选乙型肝炎病毒X蛋白作用相关蛋白质
目的 应用比较蛋白质组学方法寻找HBV X蛋白(HBx)作用相关蛋白,揭示HBx在肝细胞痛发生、发展中作用的分子机制.方法 以转染HBx基因的人肝癌细胞株HepG2-Px和转染空白载体的人肝癌细胞株HepG2-P.为研究对象,应用二维凝胶电泳技术分离2种细胞的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,蛋白质免疫印迹法验证部分差异表达的蛋白质在2株细胞中的表达水平.数据比较采用t检验.结果 得到分辨率较高、重复性较好的2株细胞系的二维凝胶电泳图谱,质谱分析共鉴定32个HBx作用相关蛋白,包括25个在HepG2-Px中表达上调的蛋白质,如热休克蛋白90AB1、Bcl-2相关抗原-2,细胞核磷酸化蛋白、细胞内氯离子通道-1、基质金属蛋白酶-3和黑色素瘤相关抗原-12等,7个表达下调的蛋白质,如Wnt-5a等.蛋白质印迹验证了部分差异表达蛋白在2株细胞中的表达水平.结论 筛选出的差异表达蛋白主要涉及宿主细胞的基囚转录、信号转导、细胞生长和增殖、细胞周期、细胞凋亡、DNA修复和细胞代谢、免疫应答等过程.提示这些与HBx相互作用的蛋白质可能与肝细胞癌的发生、发展相关,为揭示HBx的作用机制提供了线索.
肝炎病毒、乙型、基因、病毒、癌、肝细胞、细胞系、肿瘤、蛋白质组学、电泳、琼脂凝胶、质谱分析法、印迹法、蛋白质
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R5(内科学)
上海市国际科技合作项目055407036;教育部人文社会科学规划项目20060390594
2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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