10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2009.10.001
人甲型H1N1流行性感冒病毒全基因组分析与反向遗传载体的克隆
目的 明确一株人甲型H1N1流行性感冒(流感)病毒的遗传背景,建立流感病毒反向遗传的平台.方法 对分离自汕头市儿童的一株人甲型H1N1流感病毒进行空斑纯化;利用甲型流感病毒通用引物,对该病毒全基因组的8条片段(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS)进行RT-PCR全长克隆、DNA测序及初步生物信息学分析;将其8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体,构建人甲型H1N1流感病毒的反向遗传系统.结果 RT-PCR克隆得到该H1N1毒株的8条全长片段,经测序分析确认该毒株的基因序列,该毒株与2006年至2008年分离的人甲型H1N1流感病毒具有很高的同源性,未出现奥司他韦或金刚乙胺抗药性的遗传突变.PCR与测序证实,插入该菌株8个全长基因组片段的载体序列完全正确.结论 成功构建了该毒株的感染性克隆.获得了该毒株全基因组序列,为明确病毒遗传信息、提供流行病学监测数据、建立流感病毒反向遗传平台奠定了研究基础.
流感病毒A型、H1N1亚型、克隆、分子、遗传学技术、基因组、病毒、序列分析
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国家自然科学基金资助项目30771988,30571674;广东省自然科学基金资助项目05008347,8151503102000022;广东省高校优秀青年创新人才培育资助项目LYM08056
2009-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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