10.3760/j.issn:1000-6680.2007.11.001
乙型肝炎病毒前S1蛋白反式激活基因5在酵母细胞中的表达
目的 在真核生物酵母细胞中表达乙型肝炎病毒前S1蛋白反式激活基因5(PS1TP5).方法 以HepG2细胞来源的mRNA为模板,经RT-PCR法扩增PS1TP5基因,克隆到pGEM-T载体中,并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pGBKT7中,并转化酵母AH109,色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落,提取酵母蛋白质,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,以明确PS1TP5是否可在其中表达.结果 成功扩增出PS1TP5,测序鉴定符合基因库报告序列,酶切回收的PS1TP5基因片段成功克隆入酵母表达载体pGBKT7,并转化入酵母细胞AH109中,Western免疫印迹显示该基因在酵母细胞中成功表达,表达产物相对分子质量为36 950.结论 成功构建了PS1TP5酵母表达载体,并在酵母细胞中表达.
肝炎病毒、乙型、前S1蛋白、反式激活蛋白、酵母菌、基因表达
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R5(内科学)
国家自然科学基金30371288;北京市自然科学基金5042024
2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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