10.3760/j.issn:1000-6680.2007.09.007
严重急性呼吸综合征冠状病毒刺突蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化
目的 构建重组表达质粒pYES6-S,诱导SARS冠状病毒刺突蛋白(spike protein)在酿酒酵母中的表达并纯化.方法 反转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR法获得刺突蛋白基因互相重叠的四部分片段,酶切连接成全长,在大肠埃希菌E.coli JM109中构建重组表达克隆pYES6-S,在酿酒酵母中诱导表达并纯化.结果 重组克隆pYES6-S经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得1个完整的刺突蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量大小近110 000.结论 成功克隆SARS冠状病毒刺突蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究.
SARS病毒、刺突蛋白、反转录聚合酶链反应、克隆、分子、基因表达、酵母菌、酿酒
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R5(内科学)
浙江省教育厅资助项目20041044
2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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