10.3760/j.issn:1000-6680.2007.05.002
严重急性呼吸综合征病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应
目的 研究SARS冠状病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测第24、48、72和96小时SARS冠状病毒N蛋白对人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)生长活性的影响.采用ELISA检测SARS冠状病毒N蛋白作用后A549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)的浓度变化.用RNA提取试剂盒提取总RNA,RT-PCR半定量法检测A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA及基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA的表达.结果 不同浓度N蛋白对A549细胞生长均有抑制作用(表现在作用48 h后),其中以20 μg/mL浓度抑制性最强,其72 h、96 h的A值分别为0.672±0.027、0.799±0.092,与同一时间点空白对照组A值0.737±0.024、0.968±0.007相比,差异有统计学意义(P＜0.01).加入N蛋白后,4、6和12 hA549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、TGF-β1浓度上升,其中IL-6的6 h和12 h浓度分别为(119.35±5.60)ng/L和(116.29±10.49)ng/L,IL-10的4、6和12 h浓度分别为(56.75±6.28)、(64.99±7.45)和(61.28±3.56)ng/L,TGF-β1 4、6和12 h的浓度分别为(159.47±5.38)、(178.83±9.13)和(173.40±14.71)ng/L,与同一时间点对照组相比,差异有统计学意义.加入N蛋白后,A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达迅速上升,2 h即有明显升高,6 h进一步升高;MMP-9 mRNA的表达在2 h时无明显上升,6 h时有明显升高.结论 Ⅱ型肺泡上皮细胞是SARS冠状病毒的重要靶细胞,同时也是效应细胞;SARS冠状病毒结构蛋白导致A549细胞各种炎性介质的分泌增加,表现在炎性因子的浓度提高和相应的mRNA表达水平增加,可能是机体异常免疫反应的发病机制.
严重急性呼吸综合征、SARS病毒、病毒蛋白质类、肺泡、上皮细胞、炎症
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R5(内科学)
上海市科技发展基金03DZ19618
2007-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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