10.3760/j.issn:1000-6680.2006.04.004
乙型肝炎病毒转染及脂多糖刺激对HepG2细胞Toll样受体2和4表达的影响
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)转染对HepG2细胞表面Toll样受体(TLR)表达的影响及脂多糖(LPS)加重HBV转染致肝细胞损伤是否存在直接作用,进一步探讨乙型肝炎发病及重型化的发生机制.方法 以不同浓度的LPS刺激HepG2细胞、HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞),并以免疫细胞化学方法检测HepG2细胞及HepG2.2.15细胞表面TLR 2、4蛋白质表达情况,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR2、4 mRNA表达情况,用Abbot试剂检测HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg表达情况,用流式细胞仪观察细胞生长周期及细胞凋亡情况.结果 HepG2、HepG2.2.15细胞膜上均有TLR2、4蛋白质表达,免疫细胞化学染色在未加LPS及各浓度LPS刺激细胞均可见细胞膜有棕褐色着色,且随着LPS浓度增加,其着色强度增加;对0 mg/L及10 mg/L LPS诱导HepG2、HepG2.2.15细胞RNA进行RT-PCR扩增,其产物行10g/L琼脂糖凝胶电泳均可见特异性条带,且10 mg/L LPS诱导细胞TLR2和TLR4与分子量标准品的吸光度值比值明显高于0 mg/L LPS诱导细胞扩增产物,分别为306.63±6.18对519.84±9.15和700.54士13.56对1116.62±37.67,F值分别为740.58和426.07,P值分别为0.01和0.02;流式细胞仪检测细胞周期发现HepG2细胞及未经LPS诱导的HepG2.2.15未发生凋亡,各浓度LPS诱导的HepG2.2.15细胞均有细胞凋亡发生,且细胞凋亡率随着LPS浓度增加上升.结论 LPS可能通过其与肝细胞膜上的TLR结合,而参与HBV转染后肝细胞损害及肝脏炎症重型化的发病机制.
Toll样受体、肝炎病毒、乙型、HepG2细胞、HepG2.2.15细胞、内毒素类、脂多糖类
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R5(内科学)
重庆市教委资助项目
2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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