10.3760/j.issn:1000-6680.2006.04.002
人类免疫缺陷病毒-2 gag重组鸡痘病毒疫苗的构建及实验免疫研究
目的 构建并探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)-2 gag重组鸡痘病毒(FPV)在小鼠体内的免疫应答,为开发HIV-2基因重组活载体疫苗提供实验依据.方法 将HIV-2结构基因gag插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒pUTA2-gag;经转染和BrdU加压筛选,以基因组聚合酶链反应(PCR)和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌内注射免疫Balb/c小鼠,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清HIV-2抗体,流式细胞仪测定CD4+、CD8+T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果 构建出重组鸡痘病毒转移质粒pUTA2-gag;从重组病毒的基因组中可扩增出大小为766 bp的目的基因,其表达产物可与人HIV-2阳性血清发生反应,目的蛋白的相对分子质量约为55 000;重组病毒免疫组小鼠的血清出现HIV-2抗体,脾T细胞亚类的数量增加,并产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性.结论 获得一株重组鸡痘病毒,该病毒可稳定表达HIV-2结构蛋白Gag,并能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答.
HIV-2、基因、gag、重组、遗传、鸡痘病毒、免疫、细胞、抗体生成
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R3(基础医学)
国家高技术研究发展计划863计划2003AA219051;吉林省科技发展计划20030550-1
2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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