10.3760/j.issn:1000-6680.2004.03.004
丙型肝炎病毒核心区蛋白对 HepG2细胞周期、细胞凋亡和细胞端粒酶活性的影响
目的研究丙型肝炎病毒核心区(HCV-C)蛋白对肝癌细胞HepG2细胞周期、细胞凋亡和细胞端粒酶活性的影响.方法首先运用基因重组技术构建含有HCV-C基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+),然后利用脂质体介导将重组真核表达质粒转染HepG2,经G418筛选获得稳定转染HepG2细胞(HCV-C转染HepG2细胞),经逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)和间接免疫荧光法证实其中有HCV-C蛋白表达.然后进行如下实验:(1)利用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测HCV-C转染HepG2细胞、空白质粒转染HepG2细胞和未转染HepG2细胞的生长增殖率;经流式细胞术(FACS)检测3组细胞的细胞周期;(2)经流式细胞术检测细胞凋亡率;(3)经端粒重复扩增-酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA)法检测上述3组细胞端粒酶活性表达情况.结果(1)HCV-C转染HepG2细胞增殖率显著高于空白质粒转染HepG2和未转染HepG2细胞增殖率;HCV-C转染HepG2细胞S期所占百分率高于未转染HepG2细胞S期所占百分率;(2)HCV-C转染HepG2细胞凋亡率显著低于无HCV-C转染细胞凋亡率;(3)上述3组细胞端粒酶活性之间差异无显著性.结论(1)HCV-C蛋白具有抑制细胞凋亡的作用;(2)HCV-C蛋白促进HepG2从G0/1期进入S期,从而可能促进细胞生长增殖,抑制细胞凋亡;(3)HCV-C蛋白对HepG2细胞端粒酶活性没有影响,说明HCV-C蛋白不是通过上调细胞端粒酶活性途径来调节细胞周期、促进细胞增殖和抑制细胞凋亡.
C型肝炎样病毒属、脱噬作用、端粒、末端转移酶、细胞周期、病毒核心蛋白质类
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R5(内科学)
湖南省卫生厅科研项目B2003-029
2004-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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