10.3760/j.issn:1000-6680.2001.04.007
丙型肝炎病毒抗原表位基因在新的抗原呈递系统中的重组构建及高效表达
目的将人工合成的丙型肝炎病毒(HCV)E1区的抗原表位基因,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体pET-RNA2中进行高效表达.方法运用基因工程技术将人工合成的HCVE1区的抗原表位基因,构建到一种新的抗原表位呈递系统的高效表达载体pET-RNA2中,构成一个嵌合基因进行高效表达.在该载体适当的位置插入外源抗原表位可使其呈现一定的空间构象,使抗原表位位于重组蛋白的表面并有望改善其免疫原性.结果分别在载体的106、153、305位氨基酸处插入外源抗原表位基因,成功构建了重组质粒pET RNA HCV/A1、pET-RNA-HCV/A2和pET-RNA-HCV/A3,并分别在大肠杆菌中进行高效表达.表达产物相对分子质量约为45000.初步研究结果表明,在特定条件下不需要异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导就可使之获得高效表达,表达的嵌合蛋白占菌体总蛋白的40%以上.结论HCV抗原表位基因成功构建到一种新的抗原呈递系统中并获得高效表达,为深入研究HCV抗原表位的免疫学和生物学特性奠定了基础,并对今后设计诊断试剂及抗原表位特异性疫苗有一定意义.
肝炎病毒、丙型、抗原表位、抗原呈递系统、高效表达
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R511(传染病)
2004-02-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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