10.7505/j.issn.1007-9084.2013.04.005
大豆过氧化氢酶同源基因在大肠杆菌中融合表达
利用RT-PCR技术获得大豆的过氧化氢酶基因家族的GmCAT3、GmCAT4、GmCAT5的cDNA片段,进化树分析表明GmCAT3和GmCAT1/2,GmCAT5和豌豆PsCAT、豇豆VrCAT的亲缘关系较近;将3个目的基因克隆到pMD19-T载体上,再连接到pET28a表达载体上,获得重组载体pET28a-GmCAT3、pET28a-GmCAT4和pET28a-GmCAT5,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,在20℃条件下,0.1 mmol/L的IPTG诱导12h表达量最佳,诱导的目的蛋白在60kD处以包涵体的形式存在,获得重组蛋白分别占总蛋白的35.7%、44.2%和42.5%.
大豆、过氧化氢酶、大肠杆菌、表达
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Q786;S565.1(基因工程(遗传工程))
河南省教育厅科技研究重点项目12B180015
2013-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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