10.6039/j.issn.1001-0408.2016.16.15
LC-MS/MS法测定药用植物基因组DNA甲基化水平Δ
目的：建立测定药用植物基因组DNA甲基化水平的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法：采用试剂盒提取药用植物基因组DNA，并用88％甲酸在140℃下裂解DNA，经氮气吹干后，用流动相重新溶解。采用HILIC亲水作用色谱柱，以7 mmol/L甲酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.3 ml/min。采用电喷雾离子源正离子模式进行监测，多反应监测（MRM）模式下进行定量分析，计算10种常见药用植物基因组的DNA甲基化率。结果：Cyt、5mC检测质量浓度线性范围分别为1～500（r＝0.9995）、0.2～100 ng/ml（r＝0.9996），精密度试验的RSD分别为1.12％和3.68％（n＝6），日内稳定性试验的RSD分别为2.36％和4.02％（n＝5），日间稳定性试验的RSD分别为1.04％和3.54％（n＝3），重复性试验的RSD分别为1.53％和3.27％（n＝6），方法回收率分别为98.7％～102.1％、91.2％～103.5％。10种药用植物基因组的DNA甲基化率在17.63％～25.18％之间。结论：LC-MS/MS法简便、快速、灵敏度高、精密度好，可用于药用植物基因组DNA甲基化水平的检测。
DNA甲基化、液相色谱-质谱联用法、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、药用植物
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R917(药物基础科学)
广东医科大学博士学位人员科研启动项目B2013017
2016-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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2210-2212,2213
