10.6039/j.issn.1001-0408.2012.25.06
以睾酮为探针的HPLC法测定CYP3A1酶活性的方法学研究
目的:建立以睾酮为探针测定大鼠CYP3Al酶活性的方法.方法:采用高效液相色谱法,以咪达唑仑为内标,样品用乙酸乙酯萃取后重溶进样,进行睾酮特异代谢物6-β羟基睾酮(6-β-OHT)浓度测定的方法学研究.色谱柱为HypersilBDSC18,流动相为甲醇-Na2-PO4水溶液(pH8.25)(60:40),流速为1mL·min-1,检测波长为254nm.结果:6-β-OHT检测浓度线性范围为1.25~100μg·mL-1(r=0.9998),最低定量限为1.25μg·mL-1;萃取回收率为83.9%~87.4%(RSD≤8.82%),相对回收率为100.4%~103.4%(RSD≤7.05%);平均日内、日间RSD均<10%;样本室温放置4h稳定性良好.结论:所建立的方法快速、简便、重复性好,适用于体外定量测定睾酮及其代谢物6-β-OHT,也可用于体外评估CYP3A1酶的活性.
高效液相色谱法、睾酮、6-β羟基睾酮、咪达唑仑、肝微粒体、方法学
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R969.1(药理学)
2009年广东省医学科研基金B2009090
2012-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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