10.13422/j.cnki.syfjx.20190725
美洲大蠊多肽对血管生成的影响
目的:探讨美洲大蠊多肽对血管生成的作用,探讨其机制.方法:以人脐静脉内皮细胞HUVECs和人肝癌HepG2细胞为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞划痕实验,观察不同质量浓度(6.25,12.5,25,50,100 mg·L-1)的美洲大蠊多肽(PAP-1 ～3),脱脂膏和美洲大蠊多肽前体物CⅡ-3对HUVECs增殖、迁移的影响,另设正常组和沙利度胺组;采用小管形成实验检测各组HUVECs小管形成能力;通过细胞间黏附实验,观察不同质量浓度(25,50,100 mg·L-1)的美洲大蠊提取物处理后人肝癌HepG2细胞同HUVECs之间黏附能力;利用免疫细胞化学染色和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组HUVECs中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.结果:MTT比色法结果显示,多肽均能抑制HUVECs的增殖(P＜0.05),呈剂量依赖关系.不同质量浓度多肽分别作用24,48,72 h,PAP-2的抑制作用优于PAP-1,PAP-3 (P ＜0.05).不同质量浓度的CⅡ-3和脱脂膏作用,HUVECs的存活率明显升高.细胞划痕实验结果显示多肽均能抑制HUVECs迁移(P＜0.05),且随药物浓度的增加,抑制迁移的作用也越强.其中PAP-2的作用优于PAP-1和PAP-3(P＜0.05);CⅡ-3在一定程度上能抑制HUVECs迁移,但是剂量越大,抑制作用越弱;脱脂膏作用后,HUVECs迁移能力增强.小管生成实验结果显示,多肽均能抑制HUVECs小管形成(P＜0.05),且随着给药浓度的增大,抑制作用越强.其中,PAP-2对小管形成的抑制作用优于PAP-1和PAP-3(P＜0.05).CⅡ-3和脱脂膏一定程度上促进HUVECs小管的形成.细胞间黏附实验结果显示,多肽均能阻断HepG2同HUVECs之间的黏附(P＜0.05),其中PAP-2对HepG2同HUVECs间黏附的阻断作用强于PAP-1和PAP-3 (P ＜0.05).相反,CⅡ-3和脱脂膏在一定程度上却能促进HepG2同HUVECs间黏附.免疫细胞化学染色和ELISA实验结果显示,多肽均能够下调HUVECs细胞中VEGF含量(P＜0.05),且呈浓度依赖性.其中,PAP-2对VEGF的下调作用优于PAP-1和PAP-3(P＜0.05).而CⅡ-3和脱脂膏能上调HUVECs中VEGF的表达.结论:美洲大蠊多肽对HUVECs的侵袭和转移,分化形成小管的能力有一定抑制作用,并能下调细胞中VEGF蛋白的表达.其中,美洲大蠊多肽的作用优于CⅡ-3和脱脂膏,多肽中PAP-2的作用较优.
美洲大蠊多肽、人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、HepG2细胞、增殖、迁移、血管内皮生长因子(VEGF)
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R22;R242;R2-031;R285.5;R735.7(中医基础理论)
国家自然科学基金81560600
2019-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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