10.3969/j.issn.1002-0152.2015.09.010
过表达NeuroD1对脊髓反应性星形胶质细胞转分化为神经元的影响
目的:探讨过表达NeuroD1对脊髓反应性星形胶质细胞转分化为神经元的影响。方法体外原代培养SD大鼠脊髓星形胶质细胞,以划痕实验制备反应性星形胶质细胞。实验分为空白组(NV组)、对照病毒组(GFP组)和NeuroD1病毒组(NeuroD1组)。各组行划痕处理7 d后,NV组不感染病毒,GFP组感染携带GFP基因的逆转录病毒,NeuroD1组感染同时携带GFP和NeuroD1基因的逆转录病毒,24 h后同时更换神经元条件培养基。各组在1d、2d、3d、5d、7d、14d观察细胞形态,并采用免疫荧光染色方法分别在感染病毒后7d观察细胞DCX阳性率和14 d观察细胞NeuN阳性率。结果更换神经元条件培养基后,各组细胞形态发生改变,胞核明显饱满,胞浆减少,突起减少并延长。与NeuroD1组相比,NV组和GFP组细胞突起短而分枝多,胞核较小。感染病毒后7 d,NV组和GFP组细胞部分形态逐渐恢复以前形态而NeuroD1组维持变化后形态。与NV组和GFP组相比,NeuroD1组出现DCX(9.84%±2.06%)(F=40.107)和NeuN(8.25%±2.78%)阳性细胞(F=21.73),结果差异都有统计学意义(P<0.05)。结论在体外培养,NeuroD1的过表达可以介导体外培养脊髓反应性星形胶质细胞转分化为神经元。
NeuroD1、转分化、反应性星形胶质细胞、神经元、划痕
R651(外科学各论)
国家自然科学基金项目编号81301050,81271392,81401067;天津市应用基础与前沿技术研究计划编号14JCQNJC10200,15JCYB-JC28100;中国博士后基金项目编号2013M542583
2015-11-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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