李斯特菌多重PCR检测方法的建立
李斯特菌属包含6个种,致病力存在差异,其中单增李斯特菌是重要的人兽鱼共患食源性病原菌.比较基因组学研究表明,细胞壁水解酶基因iap存在于李斯特菌各个种,具有两端保守区与中间可变区;liv22-228基因区域则特异存在于伊氏李斯特菌.通过对iap竞争性PCR与liv22-228特异性PCR的反应条件优化,建立可同时鉴定李斯特菌各个种的多重PCR反应体系,敏感性达102CFU/mL,对其余15种细菌均无扩增.将该反应体系应用于135株疑似李斯特菌的水产品分离株,并结合种别确证试验,表明该多重PCR的准确率达100%.该检测体系操作简便,并具有较高的特异性、灵敏性、准确性与稳定性,能够满足水产品中李斯特菌快速筛选与种别鉴定的需求.
李斯特菌、种别、iap、liv22-228、多重PCR、检测方法
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S91(水产基础科学)
国家自然科学基金31101829;浙江省自然科学基金Q12C190019;浙江省现代微生物技术与应用重中之重学科开放基金
2013-08-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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