改良贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞
目的 培养高纯度骨髓间充质干细胞. 方法 取雄性6~8周龄SPF级S-D大鼠,采用改良贴壁法培养骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),细胞整体融合度达70%~80%时传代.观察细胞形态、贴壁性能,在P2代时以流式细胞仪鉴定检测细胞表型. 结果 P1后镜下无圆形细胞,细胞形态逐渐趋于完全一致.细胞均表现典型之贴壁特性;首次达到80%融合度时间为9~11d,P1至P2为7~8d,P2至P3为5~6d.至P3时后,每只大鼠约可得MSCs 3~5×106个细胞.细胞表型CD29阳性率为99.6%,CD90阳性率为94.9%,CD44阳性率为68.1%; CD34阴性率为98.6%,CD45阴性率为99.9%. 结论 应用改良贴壁法较为简单、易行,不需要离心等操作,基本排除了非目标细胞的污染,降低对细胞的损害,生物学特性完整,获得纯度较高的MSCs.
间充质干细胞、培养、改良贴壁法
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R329.2+8(人体形态学)
海南省自然科学基金811153
2013-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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