10.7659/j.issn.1005-6947.2014.12.009
靶向hTERT人工miRNA表达框架的构建及其对HepG2细胞端粒酶活性的抑制作用
目的:构建针对hTERT基因的人工miRNA表达框架,并验证其对HepG2细胞端粒酶活性的抑制作用.方法:应用融合PCR技术针对不同位点设计并构建3个靶向hTERT的人工miRNA表达框架,对各表达框架鉴定后,将其单独或两种共转染HepG2细胞,采用TRAP-银染法和TRAP-二聚体蝎形探针荧光定量PCR法检测细胞端粒酶活性.结果:3个针对hTERT基因的人工miRNA表达框架均成功构建,单独或共转染HepG2细胞后,HepG2细胞的端粒酶活性均被不同程度的抑制,且两种表达框架共转染的抑制作用明显大于单独转染,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:靶向hTERT基因的人工miRNA表达框架能有效而特异抑制HepG2细胞端粒酶活性,多位点联合抑制是一种有效的实验方案.
端粒、末端转移酶、RNA干扰、细胞系、肿瘤
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R730.5(肿瘤学)
中南大学本科生自由探索计划项目资助2282014bks193.
2015-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1647-1651