10.3969/j.issn.1000-484X.2022.11.005
雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响.方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体.利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液.采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染.RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用.结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低.结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性.
雄激素受体、慢病毒干扰、PTEN、肝癌
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Q2-33;R735.7
福建省中青年教师教育科研项目;福建省大学生创新训练项目;厦门医学院金课建设培育计划项目
2022-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1306-1310
