10.3969/j.issn.1000-484X.2019.18.012
miR-199a-3p通过上调NET1表达促进胃癌细胞增殖
目的:探究miR-199a-3p对肿瘤相关基因NET1表达的影响,进一步明确miR-199a-3p、NET1与人胃癌细胞株增殖的关系.方法:采用qRT-PCR检测人胃癌细胞株BCG-823、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-199a-3p的表达情况,CCK-8法检测miR-199a-3p对BCG-823细胞增殖的影响;构建重组荧光素酶报告基因pISO-NET1-3′-UTR,转染后双荧光素酶法检测荧光活性;转染miR-199a-3p和Anti-miR-199a-3p表达质粒后分别采用Western blot以及qRT-PCR检测BCG-823细胞中NET1的表达水平;NET1干扰质粒与miR-199a-3p质粒共转染后,流式细胞技术、CCK-8法分别检测BCG-823细胞凋亡及增殖情况.结果:人胃癌细胞株BCG-823、MKN-28中miR-199a-3p表达水平要显著高于GES-1细胞,且上调miR-199a-3p表达能够显著促进BCG-823、MKN-28细胞株增殖;双荧光素酶检测结果显示,共转染miR-199a-3p与pISO-Net1-3′-UTR后细胞内荧光活性要显著高于对照组(P<0.01);BCG-823细胞株转染miR-199a-3p质粒后其细胞内NET1蛋白以及mRNA的表达水平均要显著高于空白转染组;此外,转染NET1干扰质粒能够显著抑制BCG-823细胞的增殖并促进细胞凋亡(P<0.01).结论:miR-199a-3p在胃癌细胞中高表达,且可通过上调NET1表达来促进胃癌细胞增殖.
miR-199a-3p、NET1、胃癌细胞
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R392.1
湖南省医药卫生科研计划项目B2014-058
2019-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
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