10.3969/j.issn.1000-484X.2019.09.015
抗金黄色葡萄球菌 α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定
目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌 α-溶血素(α-HL)单链抗体.方法:IPTG低温诱导 α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗 α-HL全人源单链抗体(scFv).将筛选并测序鉴定正确的15株scFvs插入pLZ16载体进行表达验证和ELISA鉴定.结果:表达纯化的 α-HL融合蛋白为可溶性蛋白,大小约为90 kD.采用表达的 α-HL融合蛋白作为抗原,经过4轮噬菌体展示筛选,ELISA结果显示大约有34％ 的scFvs与α-HL具有结合特性.将与 α-HL结合良好且序列正确的15株scFvs插入pLZ16载体中进行可溶性表达后,经Western blot验证正确;ELISA鉴定结果显示:scFvs与购买的 α-HL(Sigma,USA)、金黄色葡萄球菌都具有较高的结合活性且对金黄色葡萄球菌特异,与白色葡萄球菌无交叉反应.结论:成功筛选到抗 α-HL全人源单链抗体.
α-HL、全人源单链抗体、噬菌体展示、筛选
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R392.11
四川省科技厅-西南医科大联合项目14ZC0021;泸州市-西南医科大学联合项目2017LZXNYD-T06;四川省教育厅创新团队项目16TD0022
2019-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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