10.3969/j.issn.1000-484X.2018.05.003
从T7噬菌体展示cDNA文库筛选生殖支原体黏附蛋白的互作蛋白
目的:从人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)T7噬菌体展示cDNA文库筛选生殖支原体黏附蛋白(MgPa)的互作蛋白.方法:以原核表达、纯化的重组生殖支原体黏附蛋白(rMgPa)为靶分子,对人尿道上皮细胞T7噬菌体展示cDNA文库进行4轮生物淘选,采用T7特异性引物扩增阳性克隆的插入片段,PCR产物测序后进行BLAST分析,间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot检测阳性噬菌体与rMgPa的特异结合.结果:经过4轮生物淘选,噬菌体克隆富集明显;DNA测序后经BLAST比对分析,结果表明随机挑取的32个阳性克隆包括7种不同序列,其中以RPL35重复次数最多;间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot结果表明7个代表性噬菌体均能与rMgPa特异结合.结论:60S核糖体蛋白L35(RPL35)可能是MgPa的互作蛋白,为深入了解MgPa的生物学功能以及生殖支原体的致病机制奠定了实验基础.
T7噬菌体、生殖支原体、MgPa、互作蛋白
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R375+3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金项目31370207;湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划湘教通2015-269号
2018-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
653-657
