10.3969/j.issn.1000-484X.2016.11.003
miR-142-3 p靶向ATG4 c调控RAW264畅7巨噬细胞自噬
目的：研究miR-142-3p对自噬相关基因ATG4c的靶向调控作用，探究miR-142-3p影响RAW264.7细胞自噬途径的作用机制。方法：生物信息学软件分析miR-142-3p的靶基因为ATG4c，构建pMIR-Report-ATG4c和pMIR-Report -ATG4c mut重组质粒，双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot 验证 miR-142-3p 与 ATG4c 的靶向作用；将做不同处理的RAW264.7细胞分为4组：正常细胞作为对照、50 ng／ml雷帕霉素作用2 h、EBSS饥饿作用12 h、10 nmol／L的3-甲基腺嘌呤（3-MA）作用12 h后，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-142-3p不同干预组中的相对表达情况；将miR-142-3p mimics、miR-142-3p inhibitor及miR-142-3 p control分别转染到RAW264.7细胞中，检测miR-142-3p和LC3Ⅱ的相对表达。结果：双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot验证miR-142-3p通过靶向作用于ATG4c的3′-UTR抑制其表达；与对照组相比，雷帕霉素和饥饿处理的RAW264.7细胞miR-142-3p明显上调，而3-MA处理组miR-142-3p明显下调；与miR-142-3p control组相比，转染miR-142-3p mimics组中LC3Ⅱ蛋白表达显著下调，而miR-142-3p inhibitor 组中表达显著上调。结论：miR-142-3p通过靶向调控自噬相关基因ATG4c，参与RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬的调控。
miR-142-3p、细胞自噬、ATG4c
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R392.12
国家自然科学基金No.31472168。
2016-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1578-1582,1588
