10.3969/j.issn.1000-484X.2016.01.014
抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定
目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-13阳性单链抗体;将特异性好、亲和力相对较高的阳性单链抗体转入表达载体中进行表达并鉴定。结果:经3轮噬菌体展示富集,有30%左右的克隆子为阳性;经过约500株克隆子筛选,筛选到2株特异性和亲和力相对较高,有体外中和特性的单链抗体;将筛选的单链抗体基因转入表达载体LZ16中进行了表达,并采用生物大分子相互作用技术、Western blot等进行了鉴定。结论:成功筛选到特异性好、亲和力相对较高并具有体外中和活性的抗IL-13单链抗体。
IL-13、全人源单链抗体、噬菌体展示
R392.11
四川省科技厅项目2015JY0218,013SZZ005;四川省教育厅项目13ZB0262。
2016-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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