10.3969/j.issn.1000-484X.2015.01.017
人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR－ABL适配子筛选及结构分析
目的：筛选、鉴定人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR－ABL适配子。方法：利用SELEX（ Systematic evolution of ligands by exponential）技术，以高纯度融合蛋白BCR－ABL为靶分子，从体外化学合成的长度为90 bp的随机单链DNA文库中来筛选与融合蛋白BCR－ABL特异性结合的寡核苷酸适配子，并进行解离常数（ Kd）值测定和适配子序列测定，再分别用Clustal W软件包和DNA Folding Sever分析适配子一级结构及二级结构，以酶联仪测定OD450值，根据OD值高低判定适配子亲和力大小。结果：经过13轮筛选，随机ssDNA文库与融合蛋白的亲和率从0．3％上升到47．1％，所有的一级结构没有共同的同源序列，二级结构分析结果显示，茎和环等二级结构可能是适配子和融合蛋白BCR－ABL结合的基础，其中，寡核苷酸适配子A2与BCR－ABL亲和力最高，kd值达72 nmol／L。结论：利用随机寡核苷酸文库筛选技术成功获得抗融合蛋白适配子，为临床上治疗和预防慢性粒细胞白血病提供一定的参考。
SELEX技术、慢性粒细胞白血病、融合蛋白BCR-ABL、适配子、筛选
R392
河南开封市科技局项目1403018;国家自然科学基金项目81273652资助。
2015-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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