10.3969/j.issn.1000-484X.2013.11.018
EPO光激化学发光定量检测方法的建立
目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估.方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法.研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc进行统计分析.结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法.该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好.批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应.51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml.结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法.该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点.在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制.
促红细胞生成素、光激化学发光、方法学评价
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R392-33
天津市北辰区科学技术委员会项目基金BCWS2012-07
2014-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1202-1206,1215
