10.3969/j.issn.1000-484X.2012.02.003
小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增
目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法.方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量.结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P＜0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P＜0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P＜0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P＜0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P＜0.001).结论:小鼠CD4+T细胞在含有1 μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞.
雷帕霉素、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞、IL-10、TGF-β1
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R392.4
2012-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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