抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定
目的:获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体(scFv).方法:将AIF4c9 scFv基因亚克隆于原核表达载体pPOW3,构建重组表达质粒pPOW4c9,电转化大肠杆菌DH5α,以温度诱导重组抗AIF scFv表达,经镍螯合层析柱纯化后,用ELISA和Western blot检测表达蛋白与AIF的结合特性.结果:抗AIF scFv抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和力常数KD为3.18×10-8 mol/L;纯化后的可溶性AIF scFv含量约为1.6 mg/L.重组蛋白能特异识别AIF,并且具有良好的抗体生物学活性.结论:在大肠杆菌中表达并纯化了特异性可溶性抗AIF scFv抗体.
单链抗体、酸性同功铁蛋白、可溶性表达
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R392.11
2006-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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