小檗碱对小鼠淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响
目的:分析小檗碱 (Ber) 对小鼠淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响,探讨其免疫抑制作用的机制.方法:分离小鼠淋巴结细胞,以CFSE染色,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)或者佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)进行刺激,以流式细胞仪分析小檗碱对淋巴细胞增殖率的影响;以WST-1检测淋巴细胞的增殖情况;用碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布;细胞凋亡以Annexin-V染色进行分析.结果:CFSE染色分析显示,当浓度为100、30和10 μmol/L时,Ber无论对ConA或PDB+Ion诱导的小鼠淋巴细胞增殖,都具有明显的抑制作用(P<0.05).以WST-1分析细胞增殖情况,也获得相似的结果.对细胞周期分析表明,随着小檗碱浓度的增加,处于亚二倍体峰的细胞数增加,处于S和G2/M期的细胞数则减少,而G0/G1期的细胞数基本不变.Annexin-V染色法结果表明,30 μmol/L Ber 组Annexin-V单阳性区域的百分率为(7.13±1.08)%,与PDB+Ion阴性组的百分率(2.49±0.25)%比较有显著的差异(P<0.01).结论:小檗碱对小鼠淋巴细胞的增殖有明显抑制作用,它能抑制淋巴细胞进入细胞分裂周期,这种抑制作用表现出明显的周期特异性.同时,Ber可以诱导体外培养的小鼠淋巴细胞发生凋亡.
小檗碱、淋巴细胞、细胞周期、细胞凋亡
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R392.12
国家自然科学基金30230350;国家自然科学基金30371651;国家重点基础研究发展计划973计划G1999054303和G200057006
2004-12-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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