人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达
目的:克隆人IL-24基因,构建真核表达载体,在COS-7细胞中进行表达,并检测重组表达蛋白hIL-24的抗肿瘤活性.方法:分离人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术克隆人IL-24基因,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列,构建真核重组表达载体pcDNA3-hIL-24,进行双酶切和PCR鉴定,以质粒pcDNA3-hIL-24转染COS-7细胞进行瞬时表达,用RT-PCR检测mRNA表达,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性.结果:成功获得621 bp的人IL-24基因,测序正确,经双酶切和PCR鉴定真核表达质粒构建正确,以脂质体转染COS-7细胞后,用RT-PCR法、MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测表明COS-7细胞可表达hIL-24,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549肺腺癌细胞凋亡的作用.结论:人IL-24基因的瞬时表达和凋亡效应的初步研究已获成功,为研究人IL-24抗肿瘤的分子机制和临床应用提供了实验依据.
人IL-24、克隆、表达、COS-7细胞、凋亡
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R392.13
江苏省高校自然科学基金01KJB180001
2004-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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672-676
