人Bcl-2蛋白的基因克隆、表达及初步活性分析
目的:以特定形式对高度疏水性的人Bcl-2(hBcl-2)蛋白进行可溶性表达,获得非疏水性hBcl-2蛋白并具备生物学结合活性,为进一步研究hBcl-2三维结构并在此基础上研发特异性小分子药物提供充足的蛋白样品.方法:用PCR方法对hBcl-2基因进行克隆重组,插入原核表达载体pET28a(+)中.用Western Blot和MALDI-TOF生物质谱鉴定,采用荧光极化方法进行活性测定.结果:重组hBcl-2在E.Coli中实现了高效、可溶性的融合表达,重组蛋白经纯化至电泳纯,具备了与Bcl-2家族Bak蛋白BH3功能域特异结合的能力,表明原核表达的重组hBcl-2具有较好的结合活性.结论:成功地对重组hBcl-2蛋白进行了可溶性表达和活性测定.
hBcl-2、细胞凋亡、基因克隆、原核表达
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R392
国家高技术研究发展计划863计划;国家自然科学基金30070377
2003-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
595-598
