抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-2单链抗体的构建、表达及功能研究
目的:降低鼠源性抗体的免疫原性及分子量,为其进一步研究、应用奠定基础.方法:应用RT-PCR技术,克隆SZ-2重链、轻链可变基因.应用基因重组技术构建SZ-2单链抗体表达载体pET22-2scFv,导入大肠杆菌BL21(DE3)Plys,诱导表达.流式细胞术、ELISA、Western blot检测SZ-2 scFv与血小板结合能力,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究.结果:克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22-2scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主,表达量占菌体总蛋白的25%;纯化、复性后证明表达产物具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集.结论:成功表达了SZ-2单链抗体,该小分子抗体具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集.
单链抗体、单克隆抗体、血小板
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R392.11
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
243-247，252
