微小隐孢子虫CP15基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达
目的:构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCR3.1-15,观察其在Hela细胞中的表达.方法:用BglⅡ从pMD18-T-15中酶切得到CP15基因,将其插入真核表达载体pCR3.1(+)的BamHⅠ位点,构建CP15真核表达载体pCR3.1-15,脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15基因的转录,用ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性.结果:酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pCR3.1-15;外源CP15基因能在转染细胞中有效转录;ELISA法和间接免疫荧光法实验结果表明表达产物具有良好的生物活性.结论:构建的pCR3.1-15真核表达载体在Hela细胞中具有良好的表达活性.
微小隐孢子虫、CP15、真核表达载体、Hela细胞
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R392.11
吉林省杰出青年科学基金
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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240-242