小鼠GM-CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定
目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法.方法:PCR扩增小鼠GM-CSF cDNA 3'端770 bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力.结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力.结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗.
GM-CSF、基因表达、免疫治疗
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R392.2
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
457-460
