逆转录病毒载体介导的人白细胞介素10在大鼠心肌细胞的表达
目的:建立一个在大鼠心肌细胞表达人白细胞介素10(Human Interleukin 10, hIL-10)的重组逆转录病毒载体基因转移系统,为下一步的研究工作做准备.方法:将构建的表达人白细胞介素10的逆转录病毒重组体pLX(hIL-10)SN经PA317细胞包装,G418筛选,NIH3T3细胞进行病毒滴度测定,选滴度最高的克隆(6×105CFU/ml)作为感染大鼠心肌细胞的感染细胞;用重组逆转录病毒感染大鼠心肌细胞,应用聚合酶链反应(PCR)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染大鼠心肌细胞DNA及mRNA,应用ELISA测定hIL-10在心肌细胞的表达.结果:外源性hIL-10基因已整合到心肌细胞染色体DNA并有效地转录和翻译,表达水平最高达1 755 ng/(106cells*24 h).结论:外源性hIL-10基因可以转移到大鼠心肌细胞并稳定表达,为今后研究hIL-10的作用机制及在治疗疾病中的应用打下了基础.
基因转移、逆转录病毒载体、人白细胞介素10、大鼠心肌细胞
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Q789(基因工程（遗传工程）)
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
348-351
