10.3969/j.issn.2095-2783.2017.18.008
Snail稳定表达成纤维细胞系的构建及其诱导乳腺癌细胞耐药的研究
构建稳定表达Snail的成纤维细胞株并检测其对乳腺癌细胞耐药的影响,运用pL-tdTomato-Neo和pL-tdTomato-mS-nail转染小鼠成纤维细胞3T3和L929,G418富集,单克隆挑选稳定细胞株.采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测细胞内S nail的表达.将S nail稳定表达的成纤维细胞的培养上清作为条件培养基,按30%和60%的比例与乳腺癌细胞4 T 1共培养,噻唑蓝(MTT)检测4T1对顺铂和阿霉素的IC50.运用实时荧光定量PCR检测过表达Snail的成纤维中各种细胞因子的表达.结果表明:稳定转染细胞株胞体发出红色荧光,胞内S nail水平上调,成功构建了稳定表达S nail的成纤维细胞株.MTT实验发现,4T1与过表达Snail的成纤维细胞共培养后,对顺铂和阿霉素的IC50均升高.实时荧光定量PCR实验发现,Snail能诱导成纤维细胞多种细胞因子的表达增加.在成纤维细胞中,S nail可能通过调控多种细胞因子的表达参与乳腺癌细胞对化学药物的抵抗.
细胞遗传学、Snail、成纤维细胞、乳腺癌、耐药
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Q343(遗传学分支学科)
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20130171110056;国家自然科学基金资助项目81672943,81472643
2018-01-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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