10.3969/j.issn.2095-2783.2015.18.012
耻垢分枝杆菌 MurB 蛋白的可溶性表达、纯化和多克隆抗血清制备
获得耻垢分枝杆菌 MurB 纯化蛋白，制备小鼠源性 MurB 多克隆抗血清。首先，利用 PCR 技术扩增耻垢分枝杆菌murB基因，连接至 pColdII 载体并转化至 E．coli BL21（DE3）菌株；然后，低温下以 IPTG 诱导 MurB 蛋白的表达，并利用 Ni-His 亲和层析技术纯化 MurB 蛋白；最后，将 MurB 纯化蛋白联合免疫佐剂注射 BalB／c 小鼠，经过初次免疫和2次加强免疫后分离抗血清，并分别利用 ELISA 和 Western blot 技术检测制备的抗血清对 MurB 蛋白的效价和特异性。结果显示：已获得具有理想浓度和纯度的 MurB 纯化蛋白；已制备具有较高效价的小鼠源性 MurB 多克隆抗血清，该抗血清能够特异性识别耻垢分枝杆菌可溶性蛋白组分中的 MurB 蛋白。因此，制备的 MurB 多克隆抗血清能够应用于分枝杆菌 MurB 蛋白的检测分析，为 MurB 功能研究奠定了基础。
微生物学、耻垢分枝杆菌、UDP-N-乙酰葡糖胺烯醇丙酮酸还原酶、MurB、多克隆抗血清
Q939.91(微生物学)
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20112105110002
2015-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
2157-2160
